目的探究在新型冠状病毒样本混合检测中,稀释混样检测和混采检测的合理样本数量,为大人群样本的核酸筛查提供更为快捷有效的检测方案。方法设计一种利用注射器纯化柱进行大体积样本保存液核酸提取方法,在稀释混样检测和混采检测中,对比使用该方法将全部样本保存液提取核酸和只取200μL样本保存液提取核酸时检测结果的差异。结果稀释混样检测中,对于单独一份阳性样本,取全部保存液样本提取核酸时ORF1ab基因和N基因的Ct值比取200μL保存液样本提取核酸时分别小3.583、2.904;当1份阳性样本与9份、19份阴性样本混合后,将全部样本保存液提取核酸,不同混合人份检测的Ct值差异无统计学意义(P>0.05);当混合样本多于20份时,Ct值明显变大。混采检测中,取所有保存液样本提取核酸检测所得Ct值明显小于只取200μL保存液样本提取核酸所得Ct值(目前通行方案)。结论在新型冠状病毒混合检测中,采用注射器纯化柱法将全部样本的混合保存液提取核酸,稀释混样检测时,可将混合人数上限由20人提高到50人;采用混采检测时,可以明显降低核酸检测的Ct值,从而提高检出率,减少混合检测过程中假阴性现象的发生。

山东省重点研发计划(2020CXGC011305);

新型冠状病毒; 稀释混样检测; 混采检测; 注射器纯化柱; RT-PCR;

R373.9;R944.1;R197.39;

2001-5+166227K
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